生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目生產(chǎn)工藝與設(shè)備
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發(fā)表于：2025-08-02 15:37:06
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前言
本文概述了生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目的生產(chǎn)工藝流程和生產(chǎn)設(shè)備，包括主要生產(chǎn)工藝環(huán)節(jié)和關(guān)鍵設(shè)備清單。
詳情
1. 生產(chǎn)工藝流程
1.1 細(xì)胞基因編輯平臺
項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)室位于4樓，實(shí)驗(yàn)區(qū)整體分為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室和分子實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室包括KO/KI定制服務(wù)室、基因敲除室、支原體取樣室、慢病毒實(shí)驗(yàn)室和滅菌間，主要負(fù)責(zé)對細(xì)胞進(jìn)行操作。分子實(shí)驗(yàn)室主要用于PCR檢測、支原體檢測、瓊脂糖凝膠電泳、質(zhì)粒構(gòu)建等分子學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，不接觸細(xì)胞，僅對基因片段進(jìn)行操作。
1.1.1 細(xì)胞敲除及定點(diǎn)突變工藝流程
（此處為工藝流程圖，由于無法直接轉(zhuǎn)換圖片為文字，故省略具體流程圖描述）
1.1.2 細(xì)胞基因敲入工藝流程
（此處為工藝流程圖，由于無法直接轉(zhuǎn)換圖片為文字，故省略具體流程圖描述）
1.2 質(zhì)粒載體構(gòu)建
（此處為工藝流程圖，由于無法直接轉(zhuǎn)換圖片為文字，故省略具體流程圖描述）
1.3 慢病毒包裝
（此處為工藝流程圖，由于無法直接轉(zhuǎn)換圖片為文字，故省略具體流程圖描述）
1.4 產(chǎn)排污環(huán)節(jié)分析
擬建工程主要產(chǎn)排污環(huán)節(jié)見下表：
| 類別 | 編號 | 工藝污染工序 | 主要污染物 | 備注 |
|---|---|---|---|---|
| 廢氣 | G1 | 細(xì)胞基因敲入-目標(biāo)基因擴(kuò)增 | 非甲烷總烴 | 加強(qiáng)通風(fēng)，無組織排放 |
| G2 | 目標(biāo)載體處理 | |||
| G3 | 質(zhì)粒載體構(gòu)建-目標(biāo)基因PCR擴(kuò)增 | |||
| G4 | 目標(biāo)載體線性化 | |||
| G5 | 質(zhì)粒提取 | |||
| G6 | 慢病毒包裝-目標(biāo)基因PCR擴(kuò)增 | |||
| G7 | 目標(biāo)載體處理 | |||
| 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室消毒-擦拭廢氣 | 非甲烷總烴 | 密閉負(fù)壓收集至二級活性炭吸附裝置處理經(jīng)排氣筒DA001排放 | ||
| 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)生物氣溶膠 | 經(jīng)過生物安全柜自配備空氣粒子過濾器后室內(nèi)排放 | |||
| 廢水 | W1 | 細(xì)胞敲除及定點(diǎn)突變-支原體檢測 | COD、BOD5、SS、NH3-N | 均為分子實(shí)驗(yàn)室內(nèi)凝膠板清洗過程產(chǎn)生的廢水，凝膠板第三道清洗廢水進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室污水處理裝置 |
| W2 | 細(xì)胞基因敲入-目標(biāo)載體處理 | |||
| W3 | 質(zhì)粒載體構(gòu)建-目標(biāo)基因PCR擴(kuò)增 | |||
| W4 | 目標(biāo)載體線性化 | |||
| W5 | 陽性克隆篩選 | |||
| W6 | 慢病毒包裝-目標(biāo)載體處理 | |||
| 固廢 | S1 | 細(xì)胞敲除及定點(diǎn)突變-細(xì)胞培養(yǎng) | 培養(yǎng)基廢液 | 常規(guī)實(shí)驗(yàn)廢液委托華新環(huán)境工程（武穴有限公司）安全處置 |
| S2 | 細(xì)胞支原體檢測 | TAE廢液、廢瓊脂糖凝膠、凝膠板2道清洗廢液 | ||
| S3 | 目標(biāo)基因引物驗(yàn)證 | TAE廢液 | ||
| S4 | 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S5 | 單克隆鋪板及確認(rèn) | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S6 | 細(xì)胞凍存 | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S7 | 細(xì)胞基因敲入-細(xì)胞培養(yǎng) | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S8 | 目標(biāo)基因PCR擴(kuò)增 | TAE廢液 | ||
| S9 | 目標(biāo)載體處理 | TAE廢液、廢瓊脂糖凝膠、凝膠板2道清洗廢液 | ||
| S10 | 載體構(gòu)建 | LB培養(yǎng)基廢液 | ||
| S11 | 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S12 | 單克隆篩選 | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S13 | 細(xì)胞凍存 | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S14 | 質(zhì)粒載體構(gòu)建-目標(biāo)基因PCR擴(kuò)增 | TAE廢液、廢瓊脂糖凝膠、凝膠板2道清洗廢液 | ||
| S15 | 目標(biāo)載體線性化 | TAE廢液、廢瓊脂糖凝膠、凝膠板2道清洗廢液 | ||
| S16 | 載體構(gòu)建 | LB培養(yǎng)基廢液 | ||
| S17 | 陽性克隆篩選 | TAE廢液、LB培養(yǎng)基廢液、廢瓊脂糖凝膠、凝膠板2道清洗廢液 | ||
| S18 | 質(zhì)粒提取 | LB培養(yǎng)基廢液 | ||
| S19 | 慢病毒包裝-目標(biāo)基因PCR擴(kuò)增 | TAE廢液 | ||
| S20 | 目標(biāo)載體處理 | TAE廢液、廢瓊脂糖凝膠、凝膠板2道清洗廢液 | ||
| S21 | 載體構(gòu)建 | LB培養(yǎng)基廢液 | ||
| S22 | 細(xì)胞培養(yǎng) | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S23 | 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染 | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| S24 | 病毒收集和離心 | 培養(yǎng)基廢液 | ||
| 玻璃瓶清洗 | 玻璃瓶2道清洗廢液 | 常規(guī)實(shí)驗(yàn)廢液委托華新環(huán)境工程（武穴有限公司）安全處置；慢病毒實(shí)驗(yàn)廢液委托武漢環(huán)境投資開發(fā)集團(tuán)有限公司安全處置 | ||
| 實(shí)驗(yàn)耗材 | 廢實(shí)驗(yàn)耗材 | 常規(guī)實(shí)驗(yàn)耗材委托華新環(huán)境工程（武穴有限公司）安全處置；慢病毒實(shí)驗(yàn)耗材委托武漢環(huán)境投資開發(fā)集團(tuán)有限公司安全處置 | ||
| 生物安全柜廢HEPA濾芯 | 廢濾芯 | 常規(guī)實(shí)驗(yàn)濾芯委托華新環(huán)境工程（武穴有限公司）安全處置；慢病毒實(shí)驗(yàn)濾芯委托武漢環(huán)境投資開發(fā)集團(tuán)有限公司安全處置 | ||
| 廢氣處理廢活性炭 | 廢活性炭 | 委托華新環(huán)境工程（武穴有限公司）安全處置 | ||
| 純水制備 | 純水制備廢棄物 | 交由物資回收單位 | ||
| 辦公生活 | 生活垃圾 | 交由環(huán)衛(wèi)部門處置 | ||
| 噪音 | 各工段機(jī)械噪聲 | 選用低噪聲設(shè)備、廠房隔音及綠化等 |
2. 生產(chǎn)設(shè)備
擬建項(xiàng)目主要設(shè)備見下表：
| 生產(chǎn)工藝 | 名稱 | 規(guī)模型號 | 數(shù)量（臺） |
|---|---|---|---|
| 細(xì)胞基因編輯平臺 | 1 | ||
| 1 | |||
| 2 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 2 | |||
| 2 | |||
| 3 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 2 | |||
| 質(zhì)粒載體構(gòu)建 | 1 | ||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 2 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 1 | |||
| 慢病毒包裝 | 1 | ||
| 1 | |||
| 1 |
