YY/T 0127. 6-1999 口腔材料生物學(xué)評價(jià) 第2單元:口腔材料生物試驗(yàn)方法顯性致死試驗(yàn)（完整版）
YY/T 0127. 6-1999.Biological evaluation of dental materials Unit 2:Biological test methods of dental materials-Dominant lethal test.
雌鼠未交配過。雄鼠在試驗(yàn)材料染毒后直接使用。每組應(yīng)包括15只雄鼠和240只雌鼠。
5試驗(yàn)材料與對照材料
5.1 試驗(yàn)材料制備
按YY/T 0244- -1996的規(guī)定進(jìn)行。
5.2劑量分組
在初期的顯性致死評價(jià)中,可采用單一劑量,但進(jìn)一步評價(jià)至少需要三個(gè)劑盤組。
5.2.1若試驗(yàn)材料的毒性很低或兀毒性,其最高劑量次給子應(yīng)達(dá)到 5 g/kg或5 mL/kg,多次<5次)給予應(yīng)達(dá)到1 g/(kg●d)或1 mL/(kg●d)。浸提液的最高劑量可采用50 mL/kg. .
5.2.2根據(jù)被試材料的毒性試驗(yàn)結(jié) 果最大劑盤可采用1/10~1/3 LD5o。中、小劑量約為最大劑量的1/3~1/10.高劑量組動物應(yīng)出現(xiàn)毒性癥狀或降低繁殖力.
5.3陰性對照
陰性對照可使用試驗(yàn)材料的溶劑,分散介質(zhì)或浸提介質(zhì)。例如,當(dāng)試驗(yàn)材料用0.5%吐滋80制備成混懸液使用時(shí),則陰性對照給予0. 5%吐溫80,10 mL/kg.
5.4陽性對照
可用甲基磺酸乙酯水溶液100 mg/kg或環(huán)磷酰膠水溶液200 mg/kg.在試驗(yàn)交配前一天,給雄鼠腹腔注射一次。
6生育試驗(yàn)
在接觸試驗(yàn)材料前應(yīng)進(jìn)行生育試驗(yàn),以便選擇具有生育能力的雄鼠進(jìn)行顯性致死評價(jià)?？捎?0只.雄鼠,從中獲得15只具有生育能力的雄鼠。隨機(jī)分配到各試驗(yàn)組中進(jìn)行試驗(yàn)。用1只雄鼠與2只未交配過的雌鼠合籠7天,交配大多數(shù)發(fā)生在合籠后2~3 d.在胚胎發(fā)育的第13 d,即雄、脆合籠后的第15~16 d,處死雌鼠,檢查子官內(nèi)活胎數(shù)和早、晚期死胎數(shù),以此作為顯性致死率的評價(jià)基礎(chǔ)。
7試驗(yàn)步驟
7.1 染毒
用試驗(yàn)材料染毒已選出的椎鼠?？刹捎靡淮谓o藥或多次(5次)給藥,即每日1次,連續(xù)5d.經(jīng)口或腹腔注射。
7.2 交配
于最后一次染毒后的1~2 d開始交配，第一周用1只經(jīng)試驗(yàn)材料染毒的雄鼠與2只未交配過的雌鼠合籠5d.休息2d.以后每周更換-批新雌鼠,讓雄鼠與2只未交配過的新雌鼠交配,連續(xù)6~8周，重復(fù)這- -步驟。以便評價(jià)精子生成前,減數(shù)分裂前、后階段的遺傳毒性。在合籠期期間每日檢查雌鼠陰道內(nèi)有無陰栓或陰道涂片檢查精子。查出陰栓或精子的當(dāng)天為妊娠0 d,未查出的以合籠的第4d定為妊娠0d.
