YY/T 0127. 7一2001 口腔材料生物學(xué)評(píng)價(jià) 第2單元:口腔材料生物試驗(yàn)方法牙髓牙本質(zhì)應(yīng)用試驗(yàn)（完整版）
YY/T 0127. 7一2001.Biological evaluation of dental materials-Part 2:Biological evaluation test method of dental materials-Pulp and dentine usage test.
8試驗(yàn)步驟
8.1動(dòng)物準(zhǔn)備 .
選擇足夠的動(dòng)物,以保證每個(gè)試驗(yàn)周期中至少有七顆牙齒含試驗(yàn)材料,四顆牙齒含陰性對(duì)照材料。如有必要每-試驗(yàn)周期還應(yīng)有四個(gè)陽(yáng)性對(duì)照窩洞。
8.2牙齒預(yù)備
8.2.1用合 適的麻醉劑對(duì)動(dòng)物實(shí)行全身麻醉.去除牙國(guó)所有牙石及菌斑。用3%(V/V)過(guò)氧化氫清沽、消毒牙齒表面,然后用含碘或洗必泰的消毒劑消毒。
在水噴等下,用鋒利鉆針在牙齒頰側(cè)或唇側(cè)頸部制備所衢數(shù)量的V類潤(rùn)。洞底剩余牙本質(zhì)厚度小于1mm,但不暴露牙髓、除充填試驗(yàn)材料要求不同的操作外.均應(yīng)用水清洗窩洞并用脫脂棉擦干窩洞。
注，若動(dòng)物有明品齦炎,則應(yīng)在窩溺制備前幾天去除牙石及軟垢,甚至需重復(fù)潛齒直至想炎得到控制。
8.2.2按隨機(jī)分配的原則,每 -試驗(yàn)周期至少用試驗(yàn)材料充填七個(gè)窩洞,陰性對(duì)照材料充填四個(gè)窩洞。如有必要每一-試驗(yàn)周期還應(yīng)有四個(gè)陽(yáng)性對(duì)照窩洞。對(duì)于以前有陽(yáng)性對(duì)照數(shù)據(jù)庫(kù)的試驗(yàn)室,不必再做陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn),除非有時(shí)需驗(yàn)證陽(yáng)性反應(yīng)。
注:在陰性對(duì)照氧化鋅丁香酚水門(mén)汀上可用粘接技術(shù)充填復(fù)合樹(shù)脂或充填玻璃離子水門(mén)汀(尤其是長(zhǎng)期組)。
9術(shù)后觀察
9.1在試驗(yàn)期中,定期觀察每只動(dòng)物的反應(yīng),如飲食改變或口腔組織的炎癥或化膿。
9.2 切片制備
9.2.1在7d士2d、28d士3d及70d士5d,用過(guò)量麻醉劑處死足夠數(shù)最的動(dòng)物,以得到每個(gè)試驗(yàn)周期至少七顆含試驗(yàn)材料的牙齒。檢查充填體、牙齒及其支持組織,記錄任何異常現(xiàn)象。取下每一-包含牙齒及其周圍軟硬支持組織的組織塊,用中性福爾馬林緩沖液固定。如在處死時(shí)，切取組織塊前如用血管內(nèi)濫注法固定可獲得更好的固定效果。
9.2.2固定后,用臺(tái)適的脫鈣劑脫鈣[如10%(V/V)甲酸成pH7. 4的0.5 mol/L EDTA液]。石蠟包埋,連續(xù)切片。通過(guò)牙齒窩洞沿長(zhǎng)軸進(jìn)行切片,切片厚5 pm~10 pm.間隔取片,HE染色。必要時(shí)用合適的細(xì)曹染色方法(如Brown and Brenn)或其他檢測(cè)微獬的染色方法對(duì)剩余切片染色。
10牙本質(zhì)及牙髓評(píng)價(jià)
盲法檢查{片(事先不知是試驗(yàn)切片或?qū)φ涨衅?。對(duì)每-連續(xù)切片,詳細(xì)描述并記錄牙本質(zhì)牙髓及根周組織的全部組織學(xué)特點(diǎn)，包括任何可能由窩固制備所引起的組織學(xué)變化(包括:表層及深層牙髓組織中炎癥細(xì)胞的數(shù)量及密度;切割的牙本質(zhì)小管牙酷端的成牙本質(zhì)細(xì)胞層的變化.如細(xì)胞數(shù)目的減少及移位入牙本質(zhì)小管的細(xì)胞數(shù)量;牙髓充血及出血情況;修復(fù)性牙本質(zhì)的有無(wú)及數(shù)量;窩銅壁的變色情況等)。牙髓的炎癥反應(yīng)表現(xiàn)較常見(jiàn),可從連續(xù)切片中,通過(guò)窩洞等間距地選擇至少5張切片。按下列分級(jí)方法對(duì)牙髓組織炎癥沒(méi)潤(rùn)進(jìn)行分級(jí)。
