YY/T 0127. 11-2001 牙科學(xué)用于口腔的醫(yī)療器械生物相容性臨床前評價 第2單元:口腔材料生物試驗方法蓋 髓試驗（完整版）
YY/T 0127. 11-2001.Dentistry-- -Preclinical evaluation of biocompatibility of medical devices used in dentistry-Part 2: Biological evaluation test method of dental materials-Pulp capping test.
7.2牙齒預(yù)備
7.2.1用合適的麻醉劑對動物實行全身麻醉。去除牙面所有的牙石及菌斑。用1%碘酒,75%乙醇消毒口周。用3%(V/V)過氧化氫清潔牙冠表面、牙齦及口內(nèi)軟組織。放置橡皮障以隔離所用牙齒。用含碘汀或洗必泰的消毒劑消毒牙面及術(shù)區(qū)。
在水噴霧冷卻下,用鋒利鉆針在牙齒頰面或唇面頸部距釉牙骨質(zhì)界1mm處的釉質(zhì)部位制備V類洞。洞周均應(yīng)有牙釉質(zhì),并擴展至牙齒近遠(yuǎn)中面,深達內(nèi)三分之一牙本質(zhì)或至洞底透出粉紅色。用無菌生理鹽水[0.9%(m/m)]沖洗窩洞，在窩洞中央,在無菌生理鹽水[0.9%(m/m)]沖洗下,仔細(xì)制備-直徑0.5mm~1.0mm露髓孔,且鉆針不能進入牙髓組織內(nèi)(如可用直徑0.5mm的1/2號小球鉆在窩洞中央輕輕穿通髓腔)。用無菌生理鹽水徹底沖洗窩洞直至出血停止。用無菌棉球擦干洞壁。若廠家要求用其他沖洗劑或試劑進行止血或用特殊的牙髓傷口處理方法,則按廠家要求操作。
注:若動物有明顯齦炎,應(yīng)在窩洞制備前1周去除結(jié)石及菌班,必要時可反復(fù)上述操作直至齦炎得到控制。
7.2.2 按隨機原則,每一試驗周期用試驗材料蓋髓至少7個窩洞,用對照材料蓋髓5個窩洞。在消毒調(diào)和板.上調(diào)和受試材料及對照材料.將材料放于露髓孔上,不施壓。用氧化鋅丁香酚或聚羧酸鋅水門汀墊底。最后可用粘接技術(shù)充填復(fù)合樹脂或玻璃離子水門汀。
8術(shù)后觀察
8.1在試驗期中,定期觀察每只動物的反應(yīng),如飲食改變或口腔組織的炎癥或化膿。
8.2 切片制備
8.2.17d士2d及70d士5d后,用過量麻醉劑處死足夠數(shù)量的動物以獲得至少7顆含試驗材料的牙齒。檢查充填體、牙齒及其支持組織,記錄任何異常細(xì)節(jié)。切下每一包含牙齒及其周圍軟硬支持組織的組織塊,用福爾馬林液或其他合適的固定劑固定。
若在處死動物切取組織塊之前,用固定劑進行組織血管內(nèi)灌注,固定效果更好。
8.2.2固定后,X線片檢查每一組織塊,檢查是否發(fā)生影像改變。
8.2.3用合適的脫鈣劑[如10%(V/V)甲酸或pH7. 4的0. 5 mol/L乙二胺四乙酸(EDTA)溶液]。石蠟包埋,連續(xù)切片。通過牙齒唇(頰)舌面沿牙長軸過穿髓孔自冠部至根尖部進行連續(xù)切片,切片厚5pm~10pm,間隔取片,H-E染色。必要時,用合適的細(xì)菌染色方法(如Brown&Brenn法)或其他檢查微漏的方法另取切片染色。
9牙髓評價
檢查切片,描述組織學(xué)特點。盲法檢查切片。對每一連續(xù)切片,詳細(xì)描述并記錄牙本質(zhì)、牙髓及根尖周組織的全部組織學(xué)特點(炎癥浸潤的程度和范圍、炎細(xì)胞類型、成牙本質(zhì)細(xì)胞的改變、充血、牙髓變性、牙髓壞死的性質(zhì)及范圍、牙本質(zhì)橋形成等),包括任何可能由窩洞制備所引起的組織學(xué)變化。按下列分級方法并分別對牙髓表層組織(成牙本質(zhì)細(xì)胞層、無細(xì)胞層及多細(xì)胞層)及深部牙髓組織的炎癥浸潤程度進行分級。
